关于治疗性双质粒HBV DNA疫苗IIb期临床试验总结会得出的试验结果的公告
证券代码：600332 股票简称：白云山 编号：2014－011
广州白云山医药集团股份有限公司
关于治疗性双质粒HBV DNA疫苗IIb期临床试验总结会得出的试验结果的公告
本公司董事会及全体董事保证本公告内容不存在任何虚假记载、误导性陈述或者重大遗漏，并对其内容的真实性、准确性和完整性承担个别及连带责任。
重要提示：
1、为充分保证投资者获取广州白云山医药集团股份有限公司（“本公司”）信息的权利和信息披露的及时性，本公司向广大投资者发布本公告。
2、2014年3月9日, 治疗性双质粒HBV DNA疫苗项目（以下简称“本临床研究项目”）在北京东方花园饭店召开Ⅱb期临床试验总结会（以下简称“总结会”）。根据总结会会议纪要，本公司刊登本公告。
3、本公司将尽快与相关方及专家进行沟通，并在综合权衡后决定下一步是上报国家食品药品监督管理局申请Ⅲ期临床试验，还是继续II期临床试验,或者是终止本临床研究项目等。
4、新药研制具有高风险、高投入、周期长的特性。本临床研究项目为Ⅱb期探索性临床试验，是否进行后续研究或继续推进存在重大不确定性和重大风险，本公司提请投资者注意投资风险。
本公司已于2013年12月14日在指定披露媒体《上海证券报》、《证券时报》、《中国证券报》上刊登《广州白云山医药集团股份有限公司关于治疗性双质粒HBV DNA疫苗IIb期临床研究工作初步结果的公告》及《治疗性双质粒HBV DNA疫苗治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎的疗效及安全性的随机、双盲、对照、多中心的Ⅱb期临床试验结果讨论》与上海证券交易所网站（http://www.sse.com.cn）及2013年12月13日在香港联合交易所有限公司网站（http://www.hkex.com.hk）上刊登《内幕消息及恢复买卖》，披露了本临床研究项目IIb期临床研究工作的初步结果及详细的统计数据。
2014年3月9日，本临床研究项目在北京东方花园饭店召开Ⅱb期临床试验总结会。会议由本期临床研究组组长主持，北京大学第一医院等14家临床研究单位的代表、临床统计单位的代表、项目研发单位的代表、药物导入仪单位的代表、临床监查单位的代表、申办方代表等共计44人参加本次会议。与会专家根据临床试验情况对临床数据及临床过程中的问题进行了认真讨论，主要内容如下：
1、本期临床试验是按照GCP原则开展的规范研究，实施多中心、随机、双盲、对照的临床方案，由专业的第三方CRO公司监查整个临床试验过程，由专业的临床统计单位进行临床数据的统计分析，临床数据真实可靠，统计分析客观详实。
2、从整个临床过程和结果来看，治疗性双质粒HBV DNA疫苗安全性和耐受性良好，受试者依从性良好，脱落率低。
3、免疫治疗是病毒类疾病未来的发展趋势，CHB的治疗目前正处于由非特异性治疗到特异性治疗的阶段，肿瘤的治疗亦是经历了同样的研究发展历程。本期临床试验看到了疫苗增强CHB的免疫应答和病毒学应答的有效结果。
同时，通过本期临床试验，也观察到本疫苗对HBV病毒本身变异影响不大，故将YMDD作为免疫治疗的主要观察指标是否合理还值得商榷。在治疗过程中还应考虑到本疫苗表达的HBsAg对检测结果的影响。本疫苗为特异性免疫治疗药物，在临床试验过程中应增加一些相关免疫指标的检测。目前分子生物学检测技术已经较成熟，建议通过PCR、基因快速测序的方法来观察受试者进行疫苗注射后免疫指标的变化。
4、建议对临床试验数据进行更细的分层分析，比如从受试者年龄段、病理炎症等级、性别、血清学指标等不同方面进行分组分析，找出本疫苗最佳适用人群。
5、本期临床试验的联用药物为拉米夫定，而目前临床医生几乎都不把该药作为治疗CHB患者的首选用药，若下阶段临床研究不调整联用药物，估计入组难度会较大。
6、应考虑本期临床试验入选受试者用药史的因素，不排除部分受试者为了参加本临床试验隐瞒长期进行抗病毒治疗的病史，从而对其治疗效果产生影响。
7、下一阶段的临床试验在方案设计和临床开展方面应考虑受试者入选时的年龄、病理状况、血清学指标、用药史等因素的影响，优化入选标准和检测指标，调整联合用药和给药方案（剂量、时机、疗程）。
8、应将本临床试验已经取得的成果整理成文章，在高水平的杂志上发表，既是对本研究团队工作成绩的肯定，且对下一步申报新药证书有很好的促进作用。
9、各临床单位对本疫苗的临床研究非常感兴趣，并表示将一如既往的支持和参与本疫苗的后期临床研究及产品上市推广工作。
总结会最终得出本次试验结果（摘要）为：
一、疗效指标评价为有效的数据
以下临床指标的观察中，试验组均优于对照组，且差异具统计学显著性（P<0.05）。
1、HBV DNA下降2个对数级的结果
⑴ 试验组与对照组48周相对12周HBV DNA滴度下降2个对数级的受试者比例：
FAS集分析结果：试验组（11 例/107 例=10.28%）优于对照组（4 例/115 例=3.48%），经卡方检验，组间差异有统计学意义（P值为0.044）；
PPS集分析结果：试验组（11 例/96 例=11.46%）优于对照组（4 例/106 例=3.77%），经卡方检验，组间差异有统计学意义（P值为0.037）。
⑵ 试验组与对照组64周相对12周HBV DNA滴度下降2个对数级的受试者比例：
PPS集分析结果：试验组（13 例/70 例=18.57%）优于对照组（6 例/84 例=7.14%），经卡方检验，组间差异有统计学意义（P值为0.032）。
2、HBV DNA转阴的结果
试验组与对照组第64周HBV DNA阴转率[乙肝病毒（HBV DNA）定量检测不到的百分率]：
PPS集分析结果：试验组（29 例/70 例=41.43%）优于对照组（20 例/84 例=23.81%）,经卡方检验，组间差异具有统计学意义（P=0.019）。
3、HBeAg下降至300COI的结果
试验组与对照组24周HBeAg下降至300COI的比例：
FAS集分析结果 ：试验组（83例/107例=77.57%）优于对照组（75例/115例=65.22%），经卡方检验，组间差异有统计学意义(P值为0.042)。
4、免疫学应答检测结果
最后一次疫苗注射结束后50周至70周的45例受试者免疫细胞的记忆功能检查结果：
⑴ ELISA检测HBsAg体外刺激9天受试者PBMC分泌IFN-γ应答阳性结果，FAS集分析结果：试验组（19例/22例=86.36%）优于对照组（13例/23例=56.52%），差异具显著性（P=0.047）; PPS集分析结果：试验组（16例/17例=94.12%）优于对照组（10例/19例=52.63%），差异具显著性（P=0.008）。
⑵ 抗原体外刺激6-8小时FACS检测CD3+CD8+IFN-γ+ T细胞应答结果：FAS集分析结果：试验组（17例/22例=77.27%）优于对照组（10例/23例=43.48%），差异具显著性（P=0.021）。
二、疗效指标评价为有效趋势的数据
以下疗效指标观察中，治疗组优于对照组，统计学差异显著性介于临界（0.05 1、HBV DNA载量下降结果 ⑴ 试验组与对照组40周相对12周HBV DNA滴度下降2个对数级的受试者比例： FAS集分析结果：试验组（11例/107例=10.28%）优于对照组（5例/115例=4.35%），经卡方检验，P值为0.088。 ⑵ 试验组与对照组56周相对12周HBV DNA滴度下降2个对数级的受试者比例： PPS集分析结果：试验组（12例/87例=13.79%）优于对照组（6例/97例=6.19%），经卡方检验， P值为0.083。 ⑶ 第64周与第12周试验组与对照组组间HBV DNA载量差值： PPS集分析结果：试验组（下降0.49±1.89）优于对照组（上升0.05±1.79），经Wilcoxon符号秩和检验，P值为0.072； ⑷ 第64周与第12周试验组与对照组组间HBV DNA载量前后变化率： PPS集分析结果：试验组（下降0.14±0.54）优于对照组（上升0.05±0.75），经Wilcoxon符号秩和检验，P值为0.089。 ⑸ 试验组与对照组第64周HBV DNA阴转率（乙肝病毒（HBV DNA）定量检测不到的百分率）： FAS集分析结果：试验组（30 例/107 例=28.04%）优于对照组（20例/115 例=17.39%），经卡方检验，P=0.058。 2、耐药变异生存分析的比较结果 FAS集分析结果：阿德福韦酯181位点试验组与对照组耐药变异分别发生，9例/109例=8.26%和 19例/116例=16.38%，经Cox回归检测，P值为0.105。 PPS集分析结果：阿德福韦酯181位点试验组与对照组耐药变异分别发生，8例/102例=7.84%和9例/113例=16.81%，经Cox回归检测，P值为0.080。 FAS集分析结果：阿德福韦酯181*236位点试验组与对照组耐药变异分别发生，9例/109例=8.26%和19例/116例=16.38%，经Cox回归检测，P值为0.105。 PPS集分析结果：拉米夫定173位点试验组与对照组耐药变异分别发生，4例/102例=3.92%和12例/113例=10.62%，经Cox回归检测，P值为0.095。 3、耐药变异发生率的比较结果 ⑴ 第48周阿德福韦酯181位点试验组与对照组耐药变异累积发生率： PPS集分析结果：试验组（7例/96例=7.29%）优于对照组（16例/107例=14.95%），经卡方检验，P为0.086。 ⑵ 第48周阿德福韦酯181*236位点试验组与对照组耐药变异累积发生率： PPS集分析结果：试验组（7例/96例=7.29%）优于对照组（16例/107例=14.95%），经卡方检验，P为0.086。 ⑶ 第72周访视结束拉米夫定173位点试验组与对照组耐药变异累积发生率： PPS集分析结果：试验组（1例/61例=1.64%）优于对照组（8例/79例=10.13%），经卡方检验，P为0.077。 ⑷ 第72周访视结束拉米夫定173*180位点试验组与对照组耐药变异累积发生率： PPS集分析结果：试验组（10例/61例=16.39%）优于对照组（23例/79例=29.11%），经卡方检验，P为0.079。 4、HBeAg水平下降一个对数级 ⑴ 试验组与对照组72周HBeAg相对第0周下降一个对数级的受试者比例： PPS集分析结果：试验组（47例/61例=77.05%）优于对照组（49例/78例=62.82%），经卡方检验， P值为0.072。 ⑵ 试验组与对照组24周HBeAg相对第12周下降一个对数级的受试者比例： FAS集分析结果：试验组（11例/107例=10.28%）优于对照组（5例/115例=4.35%），经卡方检验， P值为0.088。 ⑶ 试验组与对照组72周HBeAg相对第12周下降一个对数级的受试者比例： FAS集分析结果：试验组（37 例/107 例=34.58%）优于对照组（27 例/115 例=23.48%)，经卡方检验， P值为0.068。 PPS集分析结果：试验组（29 例/61 例=47.54%）优于对照组（25 例/78 例=32.05%），经卡方检验，P值为0.063。 三、疗效指标评价为阴性或无效的数据 本期探索研究拟定的病毒学突破发生的生存分析 ，试验组优于对照组，但经Cox回归检测，组间差异无统计学意义 。 本期探索研究拟定的病毒耐药变异的生存分析，如拉米夫定80位点、拉米夫定173位点、拉米夫定180位点、拉米夫定204位点，试验组优于对照组，但经Cox回归检测，组间差异均无统计学意义；第72周访视结束试验组与对照组拉米夫定80位点、拉米夫定173位点、拉米夫定180位点、拉米夫定204位点耐药变异累积发生率，试验组优于对照组，但经Cox回归检测，组间差异均无统计学意义。 本次治疗性疫苗Ⅱb期探索性研究价值 根据《慢性乙型肝炎防治指南2010年》：免疫调节治疗有望成为治疗慢性乙型肝炎（CHB）的重要手段，但目前尚缺乏疗效确切的CHB特异性免疫疗法。探索和研发增强CHB患者自身特异性免疫功能的治疗性疫苗，是该领域研究的热点和难点。 尽管本期研究拟定的耐药变异和病毒学突破指标未见显著统计学意义，但是在免疫治疗结束后12周、28周显示出病毒学应答，试验组优于对照组，且具有显著统计学意义，提示治疗性双质粒HBV DNA疫苗联合拉米夫定在一定的治疗阶段中提高了CHB患者病毒学应答，为进一步深入临床探索研究提供了依据。 特别风险提示：由于本次临床试验仅为IIb期探索性临床试验，国家有关部门就本次临床试验的批复情况、行业政策变化等因素都将影响后续的临床试验计划，敬请投资者留意投资风险。 本公司提醒投资者注意，本公司发布的信息以指定披露媒体《上海证券报》、《证券时报》、《中国证券报》与上海证券交易所网站（http://www.sse.com.cn）及香港联合交易所有限公司网站（http://www.hkex.com.hk）披露为准。 特此公告 广州白云山医药集团股份有限公司董事会 2014年3月13日